製品紹介
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製品名 |
猫。いいえ。 |
仕様 |
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BTT ファストキャスト カラフル (レッド) アクリルアミド キット、10% |
G2067-50T |
50 T |
製品説明/紹介
このキットは、10% PAGE カラー (赤色) ゲルを簡単かつ迅速に調製することを可能にし、分離ゲルとスタッキングゲルの両方を同時に調製できるため、ユーザーはゲル調製装置を準備するだけでタンパク質ゲルを迅速に調製できます。同時に、キットのスタッカー B には赤色の染料が含まれているため、スパイクプロセスを視覚化することができ、スパイク効率が大幅に向上します。ゲルは 200 V の一定圧力で電気泳動でき、電気泳動プロセスを完了するのにわずか 30 分しかかかりません。これにより、従来のゲル電気泳動システムよりも時間が短縮され、解像度が向上します。このキットで調製したゲルは、非変性 PAGE ゲル電気泳動にも使用できます。
この方法では、調製時にTEMEDを単独で添加する必要がなく、修飾された凝固剤のみでゲルを形成できるため、TEMEDの人体や環境への害が大幅に軽減されます。本製品はBis-Tris配合ゲルを改良したものであり、適合する電気泳動バッファーと併用する必要があり、Tris-Glycine電気泳動バッファーは使用できません。準備されるゲルブロックの具体的な数は、ゲルの厚さとゲルのサイズに関係します。
保管および配送条件
濡れた氷を入れて発送します。修飾された凝固促進剤は -20 度で保存する必要があります。25×Tris-MOPS SDS-PAGE バッファーは室温で保存できます。他の成分は光を避けて 2-8 度で保管する必要があります。有効期限は 12 か月間です。
製品のコンポーネント
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コンポーネント番号 |
成分 |
G2067 |
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G2067-1 |
BTTスタッカーA |
50mL |
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G2067-2 |
BTTスタッカーB(レッド) |
50mL |
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G2067-3 |
10% BTT リゾルバー A |
125mL |
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G2067-4 |
10% BTT リゾルバー A |
125mL |
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ゴ5036-5ML |
変性凝固剤 |
1mL×5 |
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ゴ2050-250ML |
25×Tris-MOPS SDS-PAGE緩衝液 |
500mL |
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ユーザーマニュアル |
1個 |
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アッセイプロトコル/手順
1. 以下の表を参照して、ターゲットタンパク質の分子量に応じて適切な PAGE リゾルバー (分離ゲル) の濃度を選択します。
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アクリルアミドの濃度 |
分離範囲 |
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8% |
35 kDa 以上 |
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10% |
10-250 kDa |
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12% |
10-100 kDa |
2. 実験要件に従って、溶液 A と B を等しい割合で混合し、適量の変性凝固剤を加えて、それぞれ分離溶液とスタッキング溶液を調製します。ガラスプレートの仕様や厚さが異なる場合でも、一般的に使用される仕様の 8.3 cm × 7.3 cm ゲルプレート (シングル) に合わせて、スタッキング溶液と分割溶液の調製量を同じ割合で調整できます。たとえば、推奨調製システムは次のとおりです。次の表のとおりです。
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構成グループ |
コンポーネント |
0.75 mm ガラスプレート |
1.0 mm ガラスプレート |
1.5mmガラスプレート |
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リゾルバ |
BTT 10% リゾルバー A |
2mL |
2.5mL |
4mL |
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BTT 10% リゾルバー B |
2mL |
2.5mL |
4mL |
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変性凝固剤 |
24 μL |
30 μL |
48 μL |
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スタッカー |
BTTスタッカーA |
1mL |
1mL |
1.5mL |
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BTTスタッカーB(レッド) |
1mL |
1mL |
1.5mL |
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変性凝固剤 |
12 μL |
12 μL |
18 μL |
3. ゲルツールを組み立てた後、まず準備したレゾルバーを加え、次に蒸留水またはエタノールなどの溶液を使用してレゾルバーの表面を密閉し、レゾルバーが十分に固まるまで(約 10-15 分)待ってから、ゲルツールを廃棄します。水またはエタノールを加え、ろ紙で残った水またはエタノールを吸い取り、用意したスタッカーを加え、コームを差し込み、固まるまで(約10-15分)待ってから使用可能になります;または、スタッカーに追加して、準備したレゾルバーをすぐにゆっくりと結合し、準備したゲル溶液の上層に均一に追加し、コームを挿入し、固まるまで待ちます(約10-15分)、その後、使用できます。
4. 調製したゲルをその日に使用できない場合は、4 度で 1-2 日間保存できます。
5. 電気泳動の前に、BTT 電気泳動バッファー (25 倍) を 1 × 電気泳動バッファーに希釈します (電気泳動バッファーを 2 回以上再利用することはお勧めしません)。
電気泳動は全行程200Vの定電圧で行うことができ、通常30分程度で電気泳動を終了することができる。
注記
1. 変性凝固剤は過硫酸アンモニウム(AP)よりも安定しています。使用時に 1 つ取り出し、その後の日常使用のために使用後 4 度で保存し、6 か月間保存できます。長期間使用しない場合は、凍結と解凍を繰り返さないように-20度で保存してください。
2. プレミックス溶液には人体に有害なモノマーアクリルアミドが含まれています。操作中の保護対策に注意してください。
3. サンプルが同時に分離ゲルに入るようにするには、スタッカーに直接充填するときに、準備したスタッカーをゆっくりと均一に追加する必要があります。
4. 修飾凝固促進剤を添加した後、できるだけ早くゲルを充填し、長時間放置しないでください。
5. ゲル化速度をさらに加速する必要がある場合は、修飾凝固剤の量を 0.5 倍に増やすことができます。
6. 温度はゲルの凝固時間に大きな影響を与えます。実験をスムーズに進めるために、一般に温度が低いほど凝固時間が長くなり、修飾凝固剤の投与量を適切に増やすことができます。温度が高いほどゲルの生成が速くなり、修飾凝固剤の投与量を適切に減らすことができます。
7. 当社は、異なるゲル電気泳動の異なるサンプルを区別するために、他の色(赤、黄、青)のスラッカーも提供しています。
8. このキットで作成したゲルは、Tris-Glycine 電気泳動バッファー システムと互換性がなく、キットに含まれる Tris-MOPS SDS-PAGE 電気泳動バッファーおよび Tris-MOPS SDS-PAGE 電気泳動の単体製品でのみ使用できます。バッファ(25×)は別途用意されています。詳細はG2050を参照してください。
研究用途のみ!
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