5×トリス-グリシン転写バッファー

この製品は、メタノールや無水エタノールを含まない、100 mM トリスと 0.96 M グリシンを主成分とする 5 倍濃縮溶液です。使用前に本品200mLをとり、脱イオン水または蒸留水500mLを加えてよく混ぜ、次に無水エタノール200mLを加えてよく混ぜ、最後に脱イオン水または蒸留水を加えて最終量1Lにしてください。十分に混合した後、20 mM トリス、192 mM グリシン、20% 無水エタノールを含む 1x トリス-グリシン転写バッファー、 25℃でpH 8.2-8.6が得られます。ウエスタンブロット実験におけるウェットまたはセミドライ転写に適しています。

室温で発送および保管します。有効期限は 12 か月間です。

1. 通常の小分子から中分子タンパク質 (25-70 kDa) の場合、300 mA の転送条件を約 30 分間使用することをお勧めします。

2. 通常の高分子タンパク質の場合、必要に応じて転送時間を延長できます。300 mA で 45-60 分間の転送条件を使用することをお勧めします。

3. 20 kDa 未満の小分子タンパク質の場合は、0.22 μm のより小さな孔径の PVDF メンブレンを使用することをお勧めします。転送条件は、20-25 分間で 200 mA、または 15-20 分間で 300 mA です。あるいは、メタノール含有量 (エタノールに置き換えることもできます) を 25% に増やして、ゲルからの小分子タンパク質の固定を強化することもできます。

4. 特に分子量の大きなタンパク質の場合、転写時間はさらに延長される可能性があります。 300 mA の転送条件を 60-90 分以上使用することをお勧めします。さらに、ゲルからのタンパク質の放出を促進するために、最終濃度が約 0.{4}}.1% になるように SDS を転写バッファーに添加できます。転送時間が長くなるため、冷却モジュールの冷却効果に注意する必要があり、必要に応じて途中で新しい冷却モジュールを交換することができます。

1. 使用液は調製後、できるだけ早く使用してください。試薬を実験室用精製水 (G4701-500 ML) で希釈することをお勧めします。

2. 環境温度が低いと結晶化が発生することがありますが、これは正常な現象です。 37度に加熱し、その間に上下を数回混ぜ、完全に溶けてから希釈して使用します。

3. 本品の通常の色は無色透明ですが、淡褐色や黄褐色に変色した場合は速やかに廃棄してください。

4. 取り扱うときは白衣と使い捨て手袋を着用してください。

研究用途のみ!

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